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什么是绿色荧光蛋白?

作者:激发光源事业部时间:2019-09-05 10:30:48浏览238 次

信息摘要:

运用荧光蛋白可以观测到细胞的活动,可以标记表达蛋白,可以进行深入的蛋白质组学实验等等.特别是在癌症研究的过程中,由于荧光蛋白的出现使得科学家们能够观测到肿瘤细胞的具体活动,比如肿瘤细胞的成长、入侵、转移和新生.

什么是绿色荧光蛋白?

(green fluorescent protein),简称GFP,这种蛋白质最早是由下村脩等人在1962年在一种学名Aequorea victoria的水母中发现.其基因所产生的蛋白质,在蓝色波长范围的光线激发下,会发出绿色萤光.这个发光的过程中还需要冷光蛋白质Aequorin的帮助,且这个冷光蛋白质与钙离子(Ca2+)可产生交互作用.由水母Aequorea victoria中发现的野生型绿色萤光蛋白,395nm和475nm分别是更大和次大的激发波长,它的发射波长的峰点是在509nm,在可见光绿光的范围下是较弱的位置.由海肾(sea pansy)所得的绿色萤光蛋白,仅有在498nm有一个较高的激发峰点.在细胞生物学与分子生物学领域中,绿色萤光蛋白基因常被用作为一个报导基因(reporter gene).一些经修饰过的型式可作为生物探针,绿色萤光蛋白基因也可以克隆到脊椎动物(例如:兔子上进行表现,并拿来映证某种假设的实验方法.

绿色荧光蛋白发光原理是什么?

绿色荧光蛋白并不需要与其他物质合作,只需要用蓝光照射,就能自己发光

绿色荧光蛋白标记技术有什么意义?

在生物学研究中,科学家们常常利用这种能自己发光的荧光分子来作为生物体的标记.将这种荧光分子通过化学方法挂在其他不可见的分子上,原来不可见的部分就变得可见了.生物学家一直利用这种标记方法,把原本透明的细胞或细胞器从黑暗的显微镜视场中“揪出来”.传统的荧光分子在发光的同时,会产生具有毒性的氧自由基,导致被观察的细胞死亡,这叫做“光毒性”,因此,在绿色荧光蛋白发现以前,科学家们只能通过荧光标记来研究死亡细胞静态结构,而绿色荧光蛋白的光毒性非常弱,非常适合用于标记活细胞.

运用荧光蛋白可以观测到细胞的活动,可以标记表达蛋白,可以进行深入的蛋白质组学实验等等.特别是在癌症研究的过程中,由于荧光蛋白的出现使得科学家们能够观测到肿瘤细胞的具体活动,比如肿瘤细胞的成长、入侵、转移和新生.

红色荧光蛋白一般用什么缓冲液溶解?

红色荧光蛋白用什么缓冲液溶解,一般取决于生产厂家的说明书保存制剂,或者使用时特殊的试剂要求。正常来讲红色荧光蛋白生产后的保存试剂都是PBS(磷酸盐缓冲液),所以使用时一般用PBS来溶解。但是如果使用时有什么特别的要求,也可以使用特殊的缓冲液溶解。但是一般红色荧光蛋白用都是用磷酸盐缓冲液来溶解的。

什么是红色萤光蛋白RFP?

红色荧光蛋白(Red Fluorecent Protein,RFP)基因是从海葵Discoso-masp中分离出的一种新的荧光蛋白基因,其蛋白质的更大吸收光谱为583 nm,不需要任何预处理便可检测到[。红色荧光蛋白因其红荧光较强的组织穿透力,已被广泛用于动物、植物和酵母等真核细胞内基因表达的报告基因。 

红色荧光蛋白RFP的萤光波长和激发波长?

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常用荧光蛋白的激发光源的选型:

型号波长荧光蛋白应用环境
LUYOR-3415RG双波长绿色荧光蛋白和红色荧光蛋白实验室
LUOYR-3415RG/D双波长绿色荧光蛋白和红色荧光蛋白电池供电,实验室和野外
LUYOR-3260R单波长绿色荧光蛋白电池供电,实验室和野外
LUYOR-3260G单波长红色荧光蛋白电池供电,实验室和野外
LUYOR-3421单波长绿色荧光蛋白潜水,100米以内

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荧光蛋白激发光源的主要产品应用:

  1. 检测转绿色荧光蛋白(GFP)基因、红色荧光蛋白(DsRed)基因植物:水稻、小麦、玉米、大豆、棉花、拟南芥

  2. 检测转GFP、DsRed基因动物:小鼠、兔子、猴子等;

  3. 检测转GFP、DsRed基因微生物:细菌、真菌、酵母等;

  4. 检测GFP、DsRed基因组织特异性表达;

 


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