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黑光灯在黄曲霉素检测中的应用

作者:紫外光源事业部时间:2019-12-10 12:03:50浏览472 次

信息摘要:

黄曲霉毒素是由黄曲霉和寄生曲霉产生的,对人和动物都具有很高的毒性和致癌性。黄曲霉毒素大量食用会导致死亡,或导致人类和动物的慢性疾病。在发达,这些有严格的筛查程序,这主要是一个经济问题-使用传统化学测试筛查玉米既昂贵又费时。天气是黄曲霉毒素发展的主要因素。在高温和干旱的年份中,真菌的生长趋于普遍。虽然通过良好的文化习惯(例如灌溉,使用杀真菌剂和更改播种日期)可以在一定程度上抵消发展,但是在严重干旱期间,这些做法的效果较差。此外,它们对于玉米生产者而言往往是昂贵的。

黄曲霉毒素为何重要?

已经发现它们可以以极低的浓度对某些实验动物致癌,例如大鼠,雪貂,鸭,鳟鱼,狗,火鸡,牛和猪。毒素阻止了细胞内蛋白质的合成以及动员脂肪的能力。因此,肝脏的生长和变化不佳,达到1 ppm或更高的水平。受影响的大多数动物会变得沮丧,毛发差,贫血,长期进食而遭受慢性损害并经常发生抽搐。黄曲霉毒素是由黄曲霉和寄生曲霉产生的,对人和动物都具有很高的毒性和致癌性。

黄曲霉毒素为什么会发生?

如果将曲霉曲霉菌储存在潮湿的地方,其温度允许霉菌生长并随后形成黄曲霉毒素,则几乎所有谷物,水果和蔬菜都可能发生黄曲霉。它在现场不是很常见,但基本上是在存储中形成的。在玉米的情况下,可以在高度污染的玉米粒附近发现不含毒素的玉米粒,大概是被黄曲霉感染了,因此可能涉及湿度和温度以外的因素,例如对玉米粒的物理损害或谷物成熟度。已经尝试使昆虫活性(玉米耳虫)与随后被黄曲霉感染受损的玉米相关联。这些都不成功,并且没有建立关系。然而,最近的昆虫损害与收获前玉米中黄曲霉毒素的存在有关。没有黄曲霉毒素污染的样品来自收获前的耳朵逃脱了昆虫活动的田地。黄曲霉极有可能入侵被昆虫破坏的收获前玉米。
黄曲霉毒素大量食用会导致死亡,或导致人类和动物的慢性疾病。在发达,这些有严格的筛查程序,这主要是一个经济问题-使用传统化学测试筛查玉米既昂贵又费时。
天气是黄曲霉毒素发展的主要因素。在高温和干旱的年份中,真菌的生长趋于普遍。虽然通过良好的文化习惯(例如灌溉,使用杀真菌剂和更改播种日期)可以在一定程度上抵消发展,但是在严重干旱期间,这些做法的效果较差。此外,它们对于玉米生产者而言往往是昂贵的。

黄曲霉毒素的更大吸收量约为360nm,摩尔吸收率约为20,000:B毒素以蓝色荧光(425nm)命名,G毒素以绿蓝色荧光(450nm)命名。B 1毒素是最常见的,由B 2毒素流过,而G毒素相当罕见。G毒素的荧光敏感性比B毒素的荧光敏感性高10倍以上。G毒素的更低可检测水平约为100 pgram,B毒素的更低可检测水平为1 ngram。

在BLAK-RAY LUYOR-3410高强度黑光灯下检查玉米是否有破裂和损坏的籽粒特征性的亮黄绿色(BGY)荧光。测试需要5分钟或更短的时间。如果观察到荧光,则可能存在黄曲霉毒素,但不一定以明显或可检测的水平存在。玉米和其他食物中的某些物质在长波紫外线照射下会发出荧光,但与黄曲霉毒素无关。许多其他真菌,例如黑曲霉,各种青霉菌,白曲霉和其他不产生黄曲霉毒素的菌种,都可以产生无害于荧光的代谢产物,因此,尽管存在条件表明具有以下条件,但荧光并不能作为表明有毒霉菌存在的具体标志。对有毒的霉菌的生长是有利的。

此外,从玉米中分离出的黄曲霉显示出广谱的黄曲霉毒素产量,从无可检测的产量到高水平(> 100 ppm)。造成这种情况的一个可能的原因是,自然毒素污染的玉米中的荧光不稳定,并且在连续暴露于可见光或紫外线的情况下在4至6周内消失,尽管该毒素并未消失。因此必须采集新鲜的样品。

黄曲霉毒素污染的玉米

黄曲霉毒素如何检测?

霉菌毒素污染是饲料行业中的一个重要问题,霉菌毒素自然发生于某些商品饲料中,在合适的条件下霉菌迅速生长并产生霉菌毒素。霉菌毒素B1是具有强烈毒性的化合物,所以应尽量避免霉菌毒素的污染。霉菌毒素的鉴定方法有许多种,从借藉“黑光灯”做简单的肉眼观察,到运用高压液相色谱仪进行的复杂分析。  
黑光灯——本测试法利用黑暗视野中的LUYOR-3410高强度黑光灯长波紫外线进行检测, 若见到明亮的绿黄色荧光(BGYF),则表示受黄曲霉毒素污染。玉米贮藏过程中尽管可能有黄曲霉素残留,但由于荧光减弱,所以会呈现假性结果。当所取样品是具代表性的,所有的谷粒是被碾碎的,且观 测是由一名有经验的操作者来实施的时候,那么,“黑光”检测就会非常准确。
血清学方法——业已发明了多种快速检测霉菌毒素的测试盒。 这些检测依靠简单的提取程序,让提取物与已处理过的表面进行反应,以引起变色反应。这些检测方法的优点是廉价、使用简便并且相当准确。这些方法大部分是作定性分析,显示阳性或阴性结果。  
色谱法——这类检测是定量分析法,依靠实验室技术,比较复杂。高压液相色谱(HPLC)和薄层层析(TLC)法是最常用的方法。它们代表标准的方法,人们常以HPLC  和TLC法作基准来评估其它方法。

黄曲霉毒素污染的玉米

黄曲霉毒素如何排毒和预防?

一旦玉米和其他产品受到污染,实际上没有任何切实可行的方法可以完全去除毒素而不改变产品。例如,加热不会破坏毒素;然而,通过用氨溶液处理受黄曲霉毒素B 1污染的玉米已经实现了一定程度的解毒,但这在商业上是不可行的。认为B 1通过二氢呋喃呋喃环系统不可逆地结合到蛋白质部分上,并且该分子的半缩醛部分可以导致酚二醛衍生物,该衍生物能够通过静电或氢与蛋白质和产物氨基酸上的氨基反应粘接。问题本质上在于确定黄曲霉菌如何以及何时侵入商品,霉菌形成黄曲霉毒素的过程涉及哪些因素以及如何防止霉菌的生长。这至少可以通过以下方法实现:

控制环境
使用化学抗真菌剂
利用自然抵抗力因子

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关于黄曲霉毒素的检测的标准:

1 GB/T 36858-2018  饲料中黄曲霉毒素B1的测定 高效液相色谱法
2 GB/T 30955-2014  饲料中黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的测定 免疫亲和柱净化-高效液相色谱法
3 GB/T 17480-2008  饲料中黄曲霉毒素B1的测定 酶联免疫吸附法
4 GB/T 18980-2003  乳和乳粉中黄曲霉毒素M1的测定 免疫亲和层析净化高效液相色谱法和荧光光度法 


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